稳转细胞构建

      稳转细胞构建实验：用脂质体转染法或慢病毒侵染的方法将构建好的含靶基因的载体导入细胞，根据不同的基因载体中所含的抗性标志选用相应的药物进行筛选混合阳性克隆。在阳性混合克隆的基础上，得到单细胞长出的阳性单克隆，继而得到稳转转染细胞株。

       稳转株构建实验原理：

       稳转细胞株是指经合适的药物浓度进行药物筛选后，得到外源DNA稳定整合到宿主染色体，并可以长时间表达外源目的基因的细胞。稳定表达细胞株弥补了瞬时感染(或转染)实验中外源基因表达时间短的缺陷，便于长期观察。稳转细胞的筛选需根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物，常用的抗性筛选有嘌呤霉素(puromycin)、 新霉素(neomycin)等。若实验需求构建稳转细胞株，我们建议通过慢病毒感染细胞进行药物筛选的方法，此方法较质粒转染可以更加有效的将外源基因整合入基因组，且整合位点处于转录相对活跃的区域，从而获得更加高效表达外源基因的稳转株细胞。

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