颈脊髓压迫大鼠模型

一、研究背景

脊髓型颈椎病是由于椎间盘突出、椎体后缘骨刺、黄韧带肥厚或钙化、椎管狭窄等颈椎椎体退化或相邻软组织的退变造成脊髓受到压迫，加之长期保持不良姿势等原因，使压迫加重导致脊髓受压或脊髓缺血，继而出现脊髓的功能障碍。

临床表现因病变脊髓被侵袭的程度、部位和范围而异。感觉障碍多不规律，手臂的麻木多见，但客观上浅痛觉障碍与病变所支配皮节不一定对应，深感觉少有受累者，可有胸或腹束带感，此时常伴有腹壁反射增强。

上肢通常多以下运动神经元通路损害为主，手笨拙，无力，表现为写字、系鞋带纽扣、用筷子等精细动作困难，随病情发展可有手内在肌萎缩，可出现上位其他上肢肌力减退。Hoffmann征(霍夫曼征)多显示阳性，可有反向桡反射，即敲击肱桡肌腹或肱二头肌腱致手指快速屈曲，与Hoffmann征阳性意义相同，或出现更早。少数高位脊髓病变可有肌张力增高，腱反射亢进等上运动神经元损害表现。

下肢多为上运动神经元通路异常，表现为肌张力不同程度的增高和肌力减损，膝反射和跟腱反射活跃、亢进，出现踝阵挛、髌阵挛、Babinski征呈阳性。肌张力增高，腱反射亢进导致走路不稳，尤其快走易跌倒、步态蹒跚、可出现痉挛步态。

脊髓型颈椎病较少引起排尿排便困难及括约肌功能障碍。

二、制备方法

 6-8周龄SD大鼠。

1.脊髓压迫材料的制备

本研究采用吸水膨胀性聚合物脱水吡喃半乳糖基为压迫材料，材料能吸水溶胀却又不溶解于水, 且具有良好的组织相容性。聚合物涂有缓释膜，以控制组织周围组织的间质液吸收，在24小时内达到最大膨胀，并在6个月内保持最大体积。试验中干燥状态的薄片被切割成细条状, 环氧乙烷消毒后分装备用。

2.动物模型制作

采用3%戊巴比妥钠60mg/kg腹腔注射麻醉大鼠，后俯卧位固定于脑立体定位仪。暴露颈背部, 在C3至C7水平剃毛备皮, 手术行无菌操作。显露C3至C7椎板, 切除椎板间黄韧带, 暴露硬脊膜。模型组将薄片聚合物置于大鼠C5-C6的椎板与硬脊膜之间。对照组的硬脊膜暴露及游离操作同模型组, 但不放置压迫材料。整个手术操作过程动作轻柔, 并注意观察大鼠的反应以及变化, 尽量避免损伤硬脊膜造成脑脊液漏, 以及避免脊髓急性损伤, 逐层止血缝合。术后均给予青霉素局部滴入预防感染。两组大鼠术后放置于37℃条件下单笼饲养。如果出现排尿功能障碍, 即实行膀胱部按摩以帮助即实行膀胱部按摩以帮助大鼠排尿, 2次/天直到大鼠恢复自行排尿功能为止。

3.模型分析指标

（1）  行为学观察

      监测大鼠爬行时下肢及躯干运动及协调情况

（2）  影像学评估

术后三个月进行MRI评估

（3）  电生理评估

分别采用SEP和MEP进行神经电生理评估

（4）  组织学观察

脊髓压迫后三个月，取材进行石蜡切片HE染色观察

三、评价与验证

1.  动物症状观察

动物在损伤后1个月前后肢可观察到共济失调和跛行，继而出现上肢关节功能障碍和抓握精细功能受损。

2.MRI影像学评估

MRI可见压迫侧脊髓形态改变，面积减少，灰白质萎缩，损伤中心损害较为严重并向头尾侧延伸。

3.电生理改变

脊髓压迫后可出现不同的SEP变化，波形出现明显改变，可表现为潜伏期延长和波幅降低。

4.病理改变

脊髓压迫后三个月，HE染色可见脊髓外观明显扭曲，神经元数量随萎缩而减少、组织结构疏松。组织内仍可见少量的出血，中央管扩张，另LFB染色可见压迫区轴突明显脱髓鞘改变。

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