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分子实验

转录组测序

      转录组测序能够有效地分析全局基因表达水平并深度分析转录组。相较于传统方法,转录组测序可精确检测低丰度基因,发现新型转录本和异构体,以及组装之前未被研究过的转录组。


      转录组测序的研究对象为特定细胞在某一功能状态下所能转录出来的所有RNA的总和,主要包括 mRNA和非编码RNA 。转录组研究是基因功能及结构研究的基础和出发点,通过新一代高通量测序,能够全面快速地获得某一物种特定组织或器官在某一状态下的几乎所有转录本序列信息,已广泛应用于基础研究、临床诊断和药物研发等领域。转录组是特定组织或细胞在某一发育阶段或功能状态下转录出来的所有RNA的总和,主要包括mRNA和非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)。转录组研究能够从整体水平研究基因功能以及基因结构,揭示特定的生物学过程,已广应用于植物候选基因发掘、功能鉴定及遗传改良等领域。随着新一代测序平台的市场化,RNA测序(RNA sequenclng,RNA-Seq)技术已成为了转录组学研究的重要手段之一。该技术利用新一代高通量测序平台对基因组cDNA测序,通过统计相关Reads(用于测序的cDNA小片段)数计算出不同mRNA的表达量,分析转录本的结构和表达水平,同时发现未知转录本和稀有转录本,精确地识别可变剪切位点以及编码序列单核苷酸多态性,提供最全面的转录组信息。转录组测序技术流程主要包括样品制备、文库构建、DNA成簇扩增、高通量测序和数据分析,相对于传统的芯片杂交平台,RNA-Seq技术具有诸多独特优势,转录组测序无需预先针对已知序列设计探针,即可对任意物种的整体转录活动进行检测,提供更精确的数字化信号、更高的检测通量以及更广泛的检测范围,是目前深入研究转录组的强大工具 

 

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