中文名称: | 过敏性紫癜大鼠模型 | 英文名称: | NA |
类型: | 过敏性紫癜动物模型 | 分级: | NA |
研制单位: | 中国医学科学院医学实验动物研究所 | 保存单位: | 中国医学科学院医学实验动物研究所 |
主要用途: | 用于过敏性紫癜研究。 | ||
是否通过鉴定与评价: | 否 |
一、疾病概况
过敏性紫癜(allegric puprura,AP),又称亨-舒综合症(Henoch-Schönlein purpura,HSP),是一种常见的血管变态反应性出血性疾病,以广泛的小血管炎为病理基础,皮肤紫癜、消化道粘膜出血、关节肿胀和肾炎等症状为其主要临床特征,是儿童中发病率最高的血管炎性病。流行病学研究提示,HSP的发病率为(10~22)/10万,好发年龄为3~10岁,并发症多,过敏性紫癜性肾炎(Henoch-Schönlein purpura nephritis,HSPN)是最严重的并发症。该病复发率高,病程迁延,患病率逐年升高,现代医学对其治疗无满意效果。
目前关于HSP的不少研究仍处在低水平阶段,鉴于直接进行人体实验的局限性,在很大程度上需要通过动物实验进行,所以HSP动物模型在整个HSP的研究中具有举足轻重的作用。目前,关于过敏性紫癜动物模型构建的报道很少,因此对该病病因、发病机制、临床治疗评价和药物开发在一定程度上受到限制。
二、发病机制
病因不明确,一般认为与过敏有关,致敏原可能为食物、感染、药物、花粉或昆虫叮咬等,临床上常不确定。致敏原进入机体刺激浆细胞,产生抗体,与抗原结合形成免疫复合物,主要是IgA免疫复合物,过多的免疫复合物不易被巨噬细胞清除,刺激5-羟色胺、组胺等血管活性物质释放,血管壁通透性增加,组织水肿。免疫复合物在血管壁或肾小球膜上沉积,产生过敏毒素,使中性粒细胞在沉积处聚集,并释放蛋白水解酶,局部组织血管损伤加剧,沉积在胃肠黏膜小血管,引起胃肠道出血。该发病机制类似于可溶性免疫复合物引起的III型超敏反应。然而在相同条件下,很多人接受相同抗原刺激后,并未发生过敏性紫癜,而有些人则首次接触这些抗原刺激即可发生致敏反应,说明患过敏性紫癜的人需具备特异反应体质,并且研究发现这种特异反应体质具有家族倾向性,即基因易感性。
1.实验动物
SD大鼠,4周龄,体重75~95g,22只,雌雄各半,SPF级动物房饲养。
2.模型构建
1)过敏体质的构建
中医热性药物干姜、荜茇、胡椒水煎剂以1:1:1的比例混合成15%的水溶液,4℃保存备用。动物适应1周后,模型组口服给药,1次/日,连续3周,对照组给以等量生理盐水,其它条件相同。
2)抗原致敏
模型动物腹腔注射卵白蛋白生理盐水与弗氏完全佐剂以1:1比例混合的乳化溶液0.5mL,1次/周,连续3 周。对照组腹腔注射等量的生理盐水。
3)抗原激发过敏反应
腹腔注射致敏3周后,动物尾静脉和皮内分别注射1%和0.3%卵白蛋白生理盐水,激发过敏反应。之后观察动物皮肤红肿状况,照相存档。
非血小板减少性皮肤紫癜症状、血尿便常规、组织病理改变(包括炎症反应炎细胞浸润、IgA免疫复合物沉积等)、血免疫指标(血清IgA及相关免疫细胞及细胞因子)等。
(一)模型的皮肤特征:
在抗原激发后,24小时内均出现不同程度的出血斑点,大鼠的出血斑点呈弥散分布,直径1mm大小,周围无红肿渗出,出现症状的比例大约为40%。
(二)模型病理特点:
模型大鼠病理表现为皮下出血,真皮水肿,血管扩张充血、出血,炎细胞浸润;肾淤血,肾小球囊腔蛋白渗出物,血管扩张充血及局灶性炎症,肾小球系膜基质增多,系膜增厚,肾小管内蛋白管型等;胃黏膜可见出血,坏死脱落;小肠绒毛血管扩张充血,上皮细胞脱落;肺淤血,血管周围水肿;肝淤血,灶性炎细胞浸润等。
免疫荧光检测发现IgA免疫复合物在模型组肾小球系膜区,血管壁及肾小球入球小动脉壁,常呈斑点状、团块状、分支状或短线状分布。
肾脏PAS染色显示模型组大鼠的肾脏肾小球系膜增生,系膜基质增厚,囊腔蛋白渗出。
(三)血常规及便潜血检测:
急性期血常规WBC升高,LYMPH减少,Gran升高(p<0.05),LYMPH%减少,Gran%升高(p<0.01),PLT无明显改变。实验前便潜血检测阴性,激发实验后10%便潜血阳性。
长春中医药大学4~12岁,住院 2~5天的12名患者血常规检测白细胞(WBC),粒细胞(Gran),单核细胞(MONO)及百分比MONO% 明显增加,分别超出正常范围的百分比为33.3% (4/12),25% (3/12),41.6% (5/12),33.3% (4/12)。淋巴细胞百分比(LYMPH%)明显减少,低于正常参考范围的比例为25% (3/12),血小板未见明显异常改变
(四)模型免疫指标改变:
血清IgA升高(p<0.05),IgG升高(p<0.01),C3,C4减少(p<0.05),IgE无明显改变(图6)。外周血CD4%下降,CD8%升高(p<0.05),CD4/CD8比值下降,IL-4、TNF-α水平升高,差别均具有统计学意义,但IL-2水平无差异。
长春中医药大学4~12岁,住院 2~5天的12名患者血清IgA, IgE升高(p<0.01),IgG升高(p<0.05),C3,C4减少(p<0.05)。血CD4+T细胞百分比下降,CD4/CD8比值下降,IL-4、TNF-α水平升高,差别均具有统计学差异。
1. 李彦红,黄澜,朱华,徐艳峰,隋小龙,徐玉环,韩云林,冯晓纯,秦川*.血液免疫学指标在过敏性紫癜大鼠和兔模型及患儿体内的比较,中国比较医学杂志,2014,24(1):62-67.
2. Yanhong Li, Xiaochun Feng, Lan Huang, Hua Zhu, Yanfeng Xu, Xiaolong Sui, Yuhuan Xu, Yunlin Han, Chuan Qin*. Hematologic and immunological characteristics of Henoch-Scho¨nlein purpura in rat and rabbit models induced with ovalbumin based on type III hypersensitivity, Scientific Reports,2015,5(8862):1-6.
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