肿瘤疾病——人源肿瘤裸鼠成瘤

        人源肿瘤裸鼠成瘤模型（Patient-Derived Xenograft, PDX）是将人类肿瘤组织移植到免疫缺陷小鼠（如裸鼠）体内构建的临床前研究模型，广泛应用于肿瘤生物学、药物筛选和个体化治疗研究。以下是关于裸鼠成瘤实验的关键信息：

一、实验流程

免疫缺陷小鼠选择

•         ●常用品系：BALB/c nude（缺乏T细胞）、NOD-scid、NSG（缺乏T、B、NK细胞）

•         ●选择依据：肿瘤侵袭性及对宿主免疫的要求（NSG小鼠成瘤率通常更高）。

  肿瘤组织来源

•         ●新鲜手术或活检样本（需无菌处理，保持组织活性）。

•         ●可移植部位：皮下（最常用）、原位（如乳腺癌移植到乳腺脂肪垫）、肾包膜下（血管丰富，成瘤快）。

  移植操作

•        ●组织块法：将肿瘤剪成1-3 mm³小块，用套管针植入小鼠皮下。

•        ●细胞悬液法：消化肿瘤为单细胞悬液，注射（需≥10⁶细胞/位点）。

•        ●辅助材料：Matrigel可提高成瘤率（提供基质支持）。

  成瘤监测

•        ●测量时间：移植后2-8周开始定期测量（依赖肿瘤类型）。

•        ●测量方法：游标卡尺测量长径（L）和短径（W），体积公式：V = 0.5 × L × W²。

•        ●终点：肿瘤体积≤1500 mm³（遵循伦理规范）。

二、关键注意事项

成功率影响因素

•        ●肿瘤类型：侵袭性强的肿瘤（如胰腺癌、三阴性乳腺癌）成瘤率较高。

•        ●样本质量：新鲜样本优于冻存样本，避免缺血坏死。

•        ●小鼠状态：年龄（4-6周最佳）、饲养环境（SPF级）。

  模型验证

•        ●组织学分析：HE染色确认移植瘤与原肿瘤的一致性。

•        ●分子标志物：通过免疫组化（IHC）或测序验证关键基因（如EGFR、PD-L1）。

•        ●传代稳定性：PDX模型可传代3-5次（后期可能出现小鼠基质细胞浸润）。

  伦理与规范

•        ●遵守动物福利原则（如OECD、AAALAC标准）。

•        ●及时处理溃疡或恶病质小鼠。

三、常见问题与解决

• 成瘤率低：

•        ●尝试NSG小鼠或肾包膜下移植。

•        ●补充雌激素（如乳腺癌模型）或细胞因子（如SCF）。

  感染风险：

•        ●使用抗生素（如恩诺沙星）预防。

• 异质性丢失：

•        ●早期传代（P1-P3）用于实验，避免长期传代导致克隆选择。

四、应用场景

       ●药物筛选：测试化疗、靶向药或免疫治疗（需人源化小鼠评估免疫药物）。

       ●机制研究：如肿瘤微环境、转移机制。

       ●个体化治疗：利用患者来源PDX指导临床用药（需快速成瘤，周期约2-6个月）。

五、替代方案

•       ●类器官模型：体外3D培养保留肿瘤特性，周期更短，但无法模拟微环境。

•       ●CDX模型（Cell Line-Derived Xenograft）：用肿瘤细胞系构建，成本低但临床相关性较弱。

       通过优化移植技术和严格质量控制，PDX模型能较好保留原肿瘤的异质性和药敏特性，是转化医学研究的重要工具。

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