130 种实验室常用试剂配制方法 (附全套资料)

实验人集合！还在为翻箱倒柜找配方抓狂？别慌，实验菌把实验室常用试剂配制方法一次打包：高频试剂、生化试剂、培养基、缓冲液……一本查全，随用随配，省钱省时！让试剂不再成为实验绊脚石。（文末领取全套 PDF）

、高频试剂配制方法

1、1 M Tris-HCl

组分浓度 1 M Tris-HCl （pH 7.4，7.6，8.0），配制量 1，配置方法：

称量 121.1 g Tris 置于 1 L 烧杯中。

加入约 800 mL 的去离子水，充分搅拌溶解。

按下表量加入浓盐酸调节所需要的 pH 值。

将溶解定容至 1 L。

高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定 pH 值，因为 Tris 溶液的 pH 值随温度的变化差很大，温度每升高 1℃，溶液的 pH 值大约降低 0.03 个单位。

2、1.5 M Tris-HCl

组分浓度 1.5 M Tris-HCl （pH 8.8），配制量 1 L ，配置方法：

称取 181.7g Tris 置于 1 L 烧杯中。

加入约 800 mL 的去离子水，充分搅拌溶解。

用浓盐酸调 pH 值至 8.8。

将溶液定容至 1 L。

高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定 pH 值，因为 Tris 溶液的 pH 值随温度的变化差异很大，温度每升高 1℃，溶液的 pH 值大约降低 0.03 个单位。

3、10×TE Buffer

组分浓度 100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA （pH 7.4，7.6，8.0），配制量 1 L ，配置方法：

量取下列溶液，置于 1 L 烧杯中。

1 M Tris-HCl Buffer（pH 7.4，7.6，8.0） 100 mL

500 mM EDTA（pH 8.0） 20 mL

向烧杯中加入约 800 mL 的去离子水，均匀混合。

将溶液定至 1 L 后，高温高压灭菌。

室温保存。

4、3 M 醋酸钠

组分浓度 3 M 醋酸钠（pH 5.2），配制量 100 mL ，配置方法：

称取 40.8 g NaOAc•3H2O 置于 100~200 mL 烧杯中，加入约 40 mL 的去离子水搅拌溶解。

加入冰乙酸调节 pH 值至 5.2。

加入去离子水将溶液定容至 100 mL。

高温高压灭菌后，室温保存。

5、PBS Buffer

组分浓度 137 mM NaCl，2.7 mM KCl，10 mM Na2HPO4，2 mM KH2PO4 ，配制量 1 L ，配置方法：

称量下列试剂，置于 1 L 烧杯中。

向烧杯中加入约 800 mL 的去离子水，充分搅拌溶解。

滴加 HCl 将 pH 值调节至 7.4，然后加入去离子水将溶液定容至 1 L。

高温高压灭菌后，室温保存。

注意：上述 PBS Buffer 中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充 1mM CaCl2 和 0.5 mM MgCl2。

6、10 M 醋酸铵

组分浓度 10 M 醋酸铵，配制量 100 mL ，配置方法：

1.称量 77.1 g 醋酸铵置于 100~200 mL 烧杯中，加入约 30 mL 的去离子水搅拌溶解。

2.加去离子水将溶液定容至 100 mL。

3.使用 0.22 μm 滤膜过滤除菌。

4.密封瓶口于室温保存。

注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压灭菌。

7、Tris- HCl 平衡苯酚

配置方法

使用原料：大多数市售液化苯酚是清亮无色的，无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色，应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚，结晶苯酚必须在 160℃ 对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物，这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致 RNA 和 DNA 的交联等。因此，苯酚的质量对 DNA、RNA 的提取极为重要，我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。

操作注意：苯酚腐蚀性极强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜等。所有操作均应在通风橱中进行，与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。

苯酚平衡：因为在酸性 pH 条件下 DNA 分配于有机相，因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其 pH 值达到 7.8 以上，苯酚平衡操作方法如下：

①液化苯酚应贮存于 -20℃，此时的苯酚呈现结晶状态。从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温，然后在 68℃ 水浴中使苯酚充分溶解。

②加入羟基喹啉（8-Quinolinol）至终浓度 0.1％。该化合物是一种还原剂、RNA 酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂，同时因其呈黄色。有助于方便识别有机相。

③加入等体积的 1M Tris-HCl（pH 8.0），使用磁力搅拌器搅拌 15 分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。

④重复操作步骤③。

⑤加入等体积的 0.1 M Tris-HCl（pH 8.0），使用磁力搅拌器搅拌 15 分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。

⑥重复操作步骤⑤，稍微残留部分上层水相。

⑦使用 pH 试纸确认有机相的 pH 值大于 7.8。

⑧ 将苯酚置于棕色玻璃瓶中 4℃ 避光保存。

8、苯酚/氯仿/异戊醇

配置方法

说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯/酚/氯仿/异戊醇（25：24：1）。氯仿可使蛋白（25 ：24 ：1） 质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。

配置方法：将 Tris-HCl 平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇（24：1）均匀混合后，移入棕色玻璃瓶中 4℃ 保存。

9、10％（W/V）SDS

组份浓度 10％（W/V）SDS ，配制量 100mL ，配置方法：

1.称量 10 g 高纯度的 SDS 置于 100~200 mL 烧杯中，加入约 80 mL 的去离子水，68℃ 加热溶解。

滴加数滴浓盐酸调节 pH 值至 7.2。

将溶液定容至 100 mL 后，室温保存。

10、2 N NaOH

组份浓度 2 N NaOH ，配制量 100 mL ，配置方法：

量取 80 mL 去离子水置于 100~200 mL 塑料烧杯中（NaOH 溶解过程中大量放热，有可能使玻璃烧杯炸裂）。

称取 8 g NaOH 小心地逐渐加入到烧杯中，边加边搅拌。

待 NaOH 完全溶解后，用去离子水将溶液体积定容至 100 mL。

将溶液转移至塑料容器中后，室温保存。

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